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hPSC解离溶液

2017-11-03

hPSC解离溶液

人多功能干细胞用细胞分散溶液 提供评价用样本!


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本品是在无饲养层培养条件下培养人ES/iPS继代细胞是使用的细胞分散溶液,不含动物或者人类来源物质,也未使用胰蛋白酶和胶原酶等酶。请与StemSure® hPSC培养基Δ结合使用。另外,Wako还准备了评价用样本(10ml),如有需要,请填写表格申请。


◆特点


●无饲养层培养用

●不含酶

●无动物来源成分

●添加有Y-27632可用于单细胞继代培养

 

 

测试项目

●无菌测试

●pH

●渗透压

●内毒素

●支原体测试


使用方法


<在使用6孔板时>

  1. 清除培养基,用D-PBS(-)清洗细胞

  2. 清除D-PBS(-),将1ml/well本品加进孔板

  3. 7℃,5%CO2条件下,培养5分钟

  4. 敲击剥离细胞群

  5. 加入2ml/well的ROCKi+培养基,通过移液枪吹散细胞群为单细胞。

    (ROCKi+培养基:指在人iPS细胞用培养基中加入Y-27632,使最终浓度变为10μmol/l的培养基。)

  6. 将分散液移至离心管,室温下1,000rpm离心3分钟。

  7. 去除上清。

  8. 继代培养时,添加2ml/wellROCKi+培养基,悬浮,种植。

  9. 冻存时,用StemSure®冻存液悬浮,分装到保存用离心管,冻存。


〔使用注意事项〕

由于细胞种类和涂层剂的不同,会使培养容器中的细胞粘着性有所不同,,用hPSC解离溶液处理至敲击能使细胞剥离。

 


人iPS细胞的细胞分散

StemSure® hPSC培养基Δ培养的人iOS细胞201B7株,添加hPSC解离溶液,观察细胞的解离状态。添加hPSC解离溶液5分钟后敲击,移液枪吹散细胞为单细胞


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iPS细胞的继代

用StemSure® hPSC培养基Δ和hPSC解离溶液对iPS细胞201B7株进行继代培养,细胞增殖能力可到6继代后,各种未分化Marker(Oct3/4, Nanog, rBC2LCN)的表达呈阳性。



《 細胞増殖能力 》



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〔細胞株〕
人iPS细胞201B7株

〔培养基组份〕
StemSure® hPSC培养基Δ + 35ng/ml bFGF

〔涂层剂〕
Matrigel® hESC-Qualified Matrix

〔细胞种植数〕
1.0×105 cells/well (使用6孔板)

《未分化性维持》



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