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原核蛋白表达纯化的三种境界

2024-12-11

文章原创: Shi Jin 文章来源:Molecular BioGeek 2024年11月27日 12:11 广东

1. 昨夜西风凋碧树,独上高楼,望尽天涯路

一开始接触原核表达蛋白,会不断尝试,拓展,从菌株到培养基,从不同类型表达质粒到各种培养温度/诱导剂浓度。新手期任何一个新方法都会让你如获至宝,跃跃欲试。仿佛有无限能量。

一个pET28a+BL21(DE3),让你有一种任何一个蛋白都不在话下的自信,“天下我有”。

2. 衣带渐宽终不悔,为伊消得人憔悴

你开始遇到一些问题,包涵体甚至不表达。

纯度与纯化过程各种层析步骤之间的问题等等。在极致的追求中,用忘我与不计成本的冲动,追求这个蛋白的成功纯化,以及下一个……

Refolding & Cleavage

HIC

Polishing (Affinity

(带促溶标签,包涵体表达——最终目的蛋白复性,切除标签)

3. 众里寻他千百度,蓦然回首,那人却在灯火阑珊处‌

你看过了许多美景

你看过了许多美女

你迷失在地图上每一道短暂的光阴

你品尝了夜的巴黎

你踏过下雪的北京

你熟记书本里每一句你最爱的真理

你开始谨慎,对于每个蛋白都有敬而远之的敬重。当你需要做出选择的时候,你希望能有一个答案,而不再尝试每一种选择。

你希望能找到一个契合的方案,而不是匆匆行事。之后再重来。

你内心藏了一些小秘密,不可轻易与语,只说给懂得人听。

逐典生物定制化原核蛋白表达服务

上海逐典生物的科学家团队在定制原核蛋白领域潜心钻研十余年,积累了极为丰富的分子设计、蛋白筛选以及工艺开发经验。迄今,已成功交付了数百种细胞因子和定制酶。逐典生物定制化原核蛋白表达服务以先进的技术平台为支撑,其中人工智能驱动的分子设计平台,可对蛋白的结构与功能进行优化设计,从而显著提高蛋白的表达效率与活性;高通量蛋白制备平台能够快速支持蛋白的表达和筛选,充分满足客户需求;此外,还有独特的包涵体变复性平台,有效解决了原核表达蛋白因错误折叠而形成包涵体这一痛点问题。

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【关于逐典】

上海逐典生物科技有限公司,坐落于中国(上海)自由贸易试验区,获得ISO9001质量体系认证,是一家从事重组蛋白研发和销售的高新科技企业。

逐典生物始终秉持以客户为中心的理念,针对重组蛋白的结构设计、纯化工艺及其稳定剂型相关的多项关键技术进行优化。专业定向蛋白变复性技术,可将大肠杆菌大量表达的变性固体蛋白转变成高活性可溶性蛋白。凭借技术优势,逐典生物新品研发周期短且可控性强,为重组蛋白的高质高效研发提供保障,为企业生产降本增效。

公司自成立以来成功开发百余种高活性细胞因子及多种高活性蛋白酶,覆盖细胞培养、病毒纯化以及质量分析等生物工艺各个环节。可广泛应用于科研、医药生产及IVD(体外诊断试剂)等领域,满足各类用户所需。