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重组无细胞蛋白质合成系统 PUREfrex® 2.0
新开发的重组无细胞蛋白质合成系统
PUREfrex® 2.0
◆背景
PUREfrex试剂盒是基于东京大学Takuya Ueda教授发明的PURE系统技术而新开发的一种重组无细胞蛋白质合成试剂。
反应系统由蛋白质、核糖体、氨基酸和NTPs组成(参考文献1,2),其中,蛋白质具有转录、翻译和能量再生的功能。蛋白质与核糖体分别单独高度纯化后组装成蛋白质合成系统,当合成蛋白质时,只需添加编码所需蛋白质的模板DNA或mRNA到反应混合液中并放置几个小时。重组系统只与组装、翻译相关因素有关,并根据需要来调整反应混合物的成分,而不必考虑高背景对下游应用的影响。
改进PUREfrex试剂盒组分纯化过程后,大大降低了RNA酶与β-半乳糖苷酶的污染。此外,每1L PUREfrex反应混合物消耗低于0.1EU的脂多糖(LPS)。PUREfrex试剂盒的所有蛋白组分没有用于纯化与检测的标记,允许使用任何标记与蛋白质结合纯化产物。
◆应用
用于制备以下蛋白质
● 原核蛋白
● 真核蛋白
● 膜蛋白
● 二硫键蛋白质
● 含有非天然氨基酸的蛋白质等