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Chaselection D-荧光素钾盐在体外生物发光、体内活体成像的检测方法!
一、体外生物发光检测
1. 将细胞铺在 24 孔黑孔板上,铺板密度为 0.5-2.0×105 个细胞/孔,37℃,培养过夜。
2. 用超纯水配制 15 mg/mL 的 D-萤光素储存液 (100×)。
注:D-萤光素溶液最好现用现配,也可分装后-20℃ 避光冻存,有效期 1 个月。
3.用预热好的细胞培养基 1: 100 稀释储存液,配制终浓度 150 μg/mL 的 D-萤光素工作液 (1×)。
4. 去除培养细胞的培养基直至无残留。
5.向细胞内添加 1×D-萤光素工作液后,立即进行图像分析。
二、小鼠活体成像检测
1.用无菌的 DPBS (no Mg2+、Ca2+) 配制 15 mg/mL 的 D-萤光素溶液,0.2 μm 滤膜过滤除菌。
注:D-萤光素溶液最好现用现配,也可分装后 -20℃ 避光冻存,有效期 1 个月。
2. 按 150 mg/kg 剂量和 10 μL/g 注射体积向每支小鼠注射相应量的 15 mg/mL D-萤光素溶液。
3.腹腔或静脉注射 5-15 min 后进行活体成像分析。
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