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细胞活力检测方法大盘点,CTG法放大招?
MTT法:又称 MTT 比色法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性 MTT 还原为不溶于水的蓝紫色结晶甲臜 (Formazan) 并沉积在细胞中,但死细胞无此功能,后经 DMSO 溶解,于 490 nm 处测定吸光值便可间接反应细胞活力。但该方法除去操作步骤耗时以外,生成的 Formazan 是不溶于水的,需经 DMSO 溶解后才能检测,增加了工作量的同时仍不能保证测定结果的准确性,且该溶剂对人体具有明显毒性。
CCK8法:相较于 MTT,无论是操作步骤还是检测时间都优化了很多。CCK8 是一种基于 WST-8 而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度、无放射性的比色检测方法(可看往期推文 CCK-8,让细胞活性检测 So Easy!)。但在实验时,一直有个问题让人很困扰——“细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅”,但这个颜色深浅的标准我 “标” 不出来怎么办?痛点!痛点!痛点
CTG 发光法:基于高灵敏度生物发光检测技术,通过对三磷酸腺苷 (ATP) 进行定量以测定培养物中活细胞数目及细胞活力。该实验方法可用三个字简单概括 “快、准、狠”,比 MTT 的处理速度快近 20 倍,节省时间近 4 小时。CTG 特有的均质检测法即 “加样-混样-检测”,使用时,只需将本试剂等体积添加至培养细胞中即可进行检测。不用感慨,细胞活力检测为什么不能如此简单?
二, MTT、CCK8 与 CTG 法特点比较
三,CTG适用于哪些实验?
首先,来了解实验 CTG 发光法的测定原理:ATP 作为细胞新陈代谢的一个重要指标,与活细胞数目呈良好的线性关系,是细胞活力检测的重要标志性分子。
ATP 生物发光的原理为:荧光素酶以荧光素、ATP 和 O2 为底物,在 Mg2+ 存在时,可将化学能转化为光能;在荧光素酶催化的发光反应中,ATP 在一定的浓度范围内,其浓度与发光强度呈线性关系,即在光信号与酶反应体系中,发光值与 ATP 呈正比,ATP 与活细胞数成正比,CTG 发光法通过 ATP 含量来进行细胞计数或活力测定,且不受化合物自发荧光的影响 (图 2),是细胞增殖测定,细胞活力测定和细胞毒性高通量筛选分析的理想选择。
四,逐典细胞活力检测试剂盒优势
1. 简单快速:试剂盒的检测过程一步到位,只需进行“加样-混合-读数”操作,大大缩短了检测时间(15 min 内可以完成检测)。
2. 灵敏度高:线性范围宽,检测窗口更大,低至10个数量的细胞即可进行检测。
3. 发光信号持久:半衰期长达3-5小时,更好满足高通量筛选需求。
4. 冻融稳定性好:经过反复10次冻融处理,信号稳定性不受影响。
Tips:小编温馨提示,不建议频繁冻融哦!
5. 性价比高:我们的试剂盒不仅性能卓越,在价格方面也表现出明显的竞争力。这意味着您可以用更少的成本获得高质量的细胞活力数据,降本增效。
五,产品数据
1.Luminescent Cell Viability Detection Kit细胞活力检测试剂盒冻融稳定性
2.Luminescent Cell Viability Detection Kit细胞活力检测试剂盒及竞品与细胞数呈线性
3.Luminescent Cell Viability Detection Kit细胞活力检测试剂盒及竞品半衰期