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上海逐典生物科技有限公司

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技术交流

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萤光素酶技术在小分子药物筛选研究中的应用

2024-03-01

一,药物研发关键点

二,理想的药物靶标筛选模型

1)高灵敏度

2)宽的线性范围

3)稳定且可重复

4)操作简单

5)可进行高通量筛选

三,高灵敏度发光检测技术:萤光素酶检测技术

荧光与化学发光的比较

由于荧光需要光激发后才能发出光,因此必须有一种方法可以区分输入光和输出光,需要滤光片将某些波长的光过滤掉,只让发射光的波长通过。然而,没有任何滤光片是完美的,总有一定量的激发光会透过滤光片,因此就增加了背景噪声。

生物化学发光过程不需要外部光源,均从发光过程中产生。这意味着没有背景光。因此,产生的光与测得的光之间存在很强的线性相关性,其线性范围远大于荧光:发光过程为7~8个数量级,而荧光过程仅为3~4个数量级。

萤光素酶:是自然界中能够产生生物发光的酶的统称。

1. 具有酶活性(信号放大能力)

2. 蛋白小

3. 没有内源性表达,背景低

4. 易于定量

5. 高灵敏度、线性范围宽

6. 反应迅速

7. 可实现双萤光素酶报告基因检测


四,萤光素酶技术应用于药物靶标筛选

基于萤光素酶的应用,开发药物靶标筛选产品:

1)检测萤光素酶水平的变化;

2)检测ATP,例如:

• RealTime-GloTM Extracellular ATP 检测

• GTPase-GloTM检测

• ENLITEN® ATP 检测

• 激酶活性检测

• 细胞/细菌活力检测

• cAMP

• Pgp糖蛋白检测

3)检测修饰的萤光素底物,例如:

• Caspase 3/7活性检测

逐典萤光素酶报告基因检测试剂盒

逐典萤光素酶报告基因检测试剂盒旨在准确、灵敏、高效地测定萤火虫萤光素酶活性,应用高通量药物筛选、药物活性检测、大规模启动子功能测定、信号通路等研究。

目前,最常使用的萤光素酶主要包括 Firefly luciferase 和 Renilla luciferase,针对报告基因检测不同的侧重需求,逐典推出了3种检测系统。