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逐典Pannarase全能核酸酶FAQ
Q:在哪一步中加入Pannarase全能核酸酶?
A:这取决于您处理的样本。在病毒纯化时,一般在病毒澄清后加入;大肠杆菌蛋白纯化时,可以在菌体裂解时就加入;在处理细胞结团问题时,可以直接加入培养基中与细胞共培养。
Q:如果反应温度无法达到37℃,该如何使用?
A:酶活性受到温度、处理时间、酶活单位的影响,如果温度无法达到37'C,可以适当添加酶的用量,或者延长孵育时间。
Q:全能核酸酶是否与蛋白酶抑制剂兼容?
A:可以兼容,但需要注意的是许多蛋白酶抑制剂含有EDTA。EDTA开始高于1 mM时,EDTA将抑制部分核酸酶的活性。
Q:按照规定用量添加了全能核酸酶,为什么降解核酸的效果不佳?
A:全能核酸酶的活性受到许多因素的影响。首先,反应体系中必须含有1-5 mM的Mg2;此外,如果反应体系中单价阳离子浓度>300 mM、磷酸盐浓度>100 mM和EDTA浓度>1 mM时活性会被抑制。
Q:如何去除全能核酸酶?
A:可以采用多种方式去除。例如深层过滤、切向流过滤、浓缩和透析过滤、色谱层析等方式。