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逐典重组胰蛋白酶:一款满足药典要求的GMP级非动物源胰蛋白酶
细胞是生物体结构和功能的基本单位,是生命活动最小的组织单位。细胞培养则是生命科学研究领域“王冠”上的“明珠”。在细胞培养过程中,细胞消化是一项重要的步骤,通过细胞消化可使培养过程中产生的粘连蛋白被分解掉,让细胞分散,而且有利于细胞进行营养交换,从而维持细胞的正常生命周期和功能。
逐典重组胰蛋白酶
Trypelectase 重组胰蛋白酶是逐典生物专门为疫苗、病毒载体生产设计,具有高效、非动物源和高质量标准的特点。该胰蛋白酶氨基酸序列与猪胰腺来源的胰蛋白酶一致,由大肠杆菌(E.col) 重组表达生产。在GMP级别环境中生产的重组胰蛋白酶能高效消化贴壁细胞且不造成伤害,产品质量满足药典要求。
逐典重组胰蛋白酶特点
1.GMP级生产环境、符合药典标准
2.重组生产、不含杂酶
3.批量生产、质量稳定
4.高纯度、高比活
5.非动物源原料
逐典重组胰蛋白酶应用场景
组织块的消化解离和原代细胞的获取、贴壁细胞的传代消化和收获、微载体方法培养的细胞消化和收获。
实验数据
CT26.WT 和 HEK293FT 细胞消化实验
CT26WT和HEK293FT在经Trypelectase重组胰酶消化3min后解离效果较好,细胞活率显示对细胞伤害较小,不会影响细胞传代。
Trypelectase重组猪胰酶对细胞消化过程及传代24h细胞贴壁图
逐典重组胰蛋白酶常见问题
Q:逐典重组胰蛋白酶配置是否需要过滤?
A:需要使用0.22μm滤膜除菌过滤,这个在母液配置和工作液(即稀释后)的配置中都是需要的。
Q:逐典重组胰酶产品是否是无菌产品?
A:不是无菌产品,产品COA中是微生物限度标准为100CFU,所以在配置使用前需要进行无菌过滤。
Q:逐典重组胰蛋白酶的配置有哪些环节?分几步?
A:重组胰酶从干粉到能直接使用的工作液需要两大环节。第一步:需要配置成低PH的母液,除菌过滤;第二步:再进行中性缓冲液稀释,过滤除菌后就能直接使用了。
Q:逐典重组胰酶的主要优点是那些?
A:非动物来源、GMP环境生产、高酶活、高稳定性。
Q:逐典重组胰酶的建议使用浓度是多少?
A:配置母液的浓度是10 mg/ml,配置工作液浓度是0.5 mg/ml。
Q:逐典重组胰酶产品如何保存?干粉?母液?工作液?
A:一般来说,我们的干粉产品 -20℃保存 2年没有问题, 配成母液-20℃保存 1年没有问题,工作液的话-20℃保存 1-3个月没有问题,临时用放在4℃可保存一周内,但还是建议客户现用现配。
Q:消化细胞的胰酶是不是浓度越高越好?
A:不是的,一般来说消化细胞会有一个最佳胰酶浓度,达到最适浓度后浓度升高会伤害细胞。
Q: 细胞消化时间长是不是意味着胰酶产品性能不行?
A: 一般的细胞消化时间3-5min都是很正常的,难消化的细胞10-15min也是存在的。 细胞消化时间长短不能完全决定产品性能,产品的比活、活性、级别、生产技术、以及质量标准等因素都是评判产品性能的条件。
Q: 如何控制胰酶消化时间?
A: 不同细胞对消化液的敏感性不同,胰酶消化的时间也会有差异。胰酶消化时间与胰酶的浓度,是否含EDTA,胰酶的储存时间,胰酶的储存温度,是否反复冻融,消化加入的胰酶体积,消化温度及细胞的密度有关。