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腺病毒包装
Vectorbuilder
AVPM
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腺病毒载体（Adenovirus）能够携带大片段外源DNA、感染分裂细胞和非分裂细胞、诱导体液和细胞免疫应答（这对于疫苗开发是有益的）、表现出高效率的转导和高水平的转基因表达、不整合细胞DNA（在细胞内保持dsDNA游离体）。这些特性使腺病毒作为用于基因治疗的转基因载体、疫苗载体和溶瘤病毒疗法中使用的载体。我们开发出一系列专有技术和试剂，从病毒滴度、纯度、活性以及一致性等方面显著提升了腺病毒包装工艺水平。
Ad5
Ad5/F35
Gutless腺病毒
| 生产规格 | Unit Size | 最小滴度 | 分装 | 价格（CNY） | 周期 |
| 腺病毒⼩量制备 | >2.5 x 109 IFU | >1 x 1010 IFU/ml | 10 x 25 ul | ￥4,600.00 | 27-39天 |
| 腺病毒中量制备 | >1 x 1010 IFU | >1 x 1010 IFU/ml | 10 x 100 ul | ￥6,900.00 | 27-39天 |
| 腺病毒大量制备 | >1 x 1011 IFU | >1 x 1011 IFU/ml | 10 x 100 ul | ￥11,600.00 | 27-39天 |
| 超纯化腺病毒中量制备 | >5 x 1011 VP | >1 x 1012 VP/ml | 10 x 50 ul | ￥14,000.00 | 29-43天 |
| 超纯化腺病毒⼤量制备 | >1 x 1012 VP | >1 x 1012 VP/ml | 10 x 100 ul | ￥17,400.00 | 29-43天 |
我们提供第一代腺病毒（E1/E3-deleted Ad5）和嵌合型腺病毒（Chimeric adenovirus）包装服务。Ad5病毒的感染是通过病毒颗粒表面的纤突（Fiber）与细胞表面受体CAR（Coxsackie virus and adenovirus receptor）特异性结合而介导的。 并不是所有细胞都高表达CAR，Ad5病毒在某些不表达或者低表达CAR的细胞种类上的应用受限。我们开发了嵌合型腺病毒，它的感染是通过嵌合型纤突（Chimeric fiber）与细胞表面分子CD46特异性结合而介导的。
| 非纯化腺病毒制备服务 | 纯化腺病毒制备服务 | |
| 交付内容 | 定制病毒，按照规格交付：
| 定制病毒，按照规格交付：
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对照病毒，按照定制病毒的规格对应赠送：
| 对照病毒，按照定制病毒的规格对应选购：
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辅助病毒，按照定制病毒的规格对应选购：
| 辅助病毒，按照定制病毒的规格对应选购：
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| 病毒重悬液 | HBSS缓冲液 | GTS缓冲液 |
| 运输/存储 | 干冰/-80°C，避免反复冻融 | 干冰/-80°C，避免反复冻融 |
| 推荐应用 | 体外培养细胞转导 | 动物体内细胞转导 |
对照病毒
为了更好地开展您的实验，我们按照“对照病毒与定制病毒的生物学应用相匹配”的原则给您赠送或者推荐对照病毒。例如，如果定制病毒表达一个基因，则推荐的对照病毒表达荧光蛋白EGFP。如果定制病毒表达打靶某个基因的shRNA，则对照病毒表达一个Scramble shRNA。推荐的对照病毒信息如下表所示：
| 对照病毒 | 对照载体名称 | 对照载体ID | 定制病毒 |
| EGFP对照腺病毒，CMV启动子 | pAV[Exp]-CMV>EGFP | VB010000-9299hac | 哺乳动物基因表达腺病毒（包含FLEX条件性表达）、哺乳动物腺病毒CRISPR系统、哺乳动物非编码RNA表达腺病毒 |
| EGFP对照腺病毒，EF1A启动子（选购） | pAV[Exp]-EF1A>EGFP | VB900088-2235wrm | |
| mCherry对照腺病毒，CMV启动子（选购） | pAV[Exp]-CMV>mCherry | VB010000-9300kfr | |
| mCherry对照腺病毒，EF1A启动子（选购） | pAV[Exp]-EF1A>mCherry | VB010000-9408agb | |
| Scramble shRNA对照腺病毒，EGFP荧光 | pAV[shRNA]-EGFP-U6>Scramble_shRNA | VB010000-0020ytx | 哺乳动物shRNA干扰腺病毒 |
| Scramble shRNA对照腺病毒，mCherry荧光 | pAV[shRNA]-CMV>mCherry-U6>Scramble_shRNA | VB010000-0021kwc | |
| Scramble miR30-shRNA对照腺病毒，EGFP荧光 | pAV[miR30]-CMV>EGFP:Scramble_miR30-shRNA:WPRE | VB010000-9350dnk | 哺乳动物miR30-shRNA干扰腺病毒 |
| FLEX-EGFP对照腺病毒（选购） | pAV[FLEX_on]-CMV>rev(EGFP) | VB010000-9327vmy | 哺乳动物基因FLEX条件性表达腺病毒 |
辅助病毒
为了更好地开展您的实验，我们按照“辅助病毒与定制病毒的生物学应用相匹配”的原则给您推荐辅助病毒。例如，如果定制化的病毒是一个gRNA腺病毒（只表达gRNA），则需要一个表达Cas9的辅助病毒，才能进行CRISPR编辑实验。推荐的辅助病毒信息如下表所示：
| 对照病毒 | 对照载体名称 | 对照载体ID | 定制病毒 |
| Cas9 腺病毒（选购） | pAV[Exp]-CMV>hCas9 | VB180820-1032mbq | 哺乳动物gRNA 腺病毒（不含Cas9） |
| Cre腺病毒（选购） | pAV[Exp]-CMV>Cre | VB180308-1398jmt | 哺乳动物基因FLEX条件性表达腺病毒 |
我们的非纯化腺病毒存储于HBSS缓冲液，纯化腺病毒存储于GTS缓冲液中，并采用干冰运输。收到腺病毒后，立即放置于-80°C，可保存约一年。若放置于-20°C，则可保存2-3周。融解后的腺病毒可在4°C保存1-2周。虽然腺病毒比其他多数病毒稳定（如慢病毒），但是也请避免反复冻融，因为这会导致腺病毒滴度显著下降。
| 步骤 | 描述 | 时间 |
Plasmid linearization and Transfection | 我们常规使用的第一代腺病毒包装系统包括1个含有缺失了E1/E3基因的腺病毒基因组序列的转移质粒（Transfer plasmid）和1个表达E1基因的包装细胞（adenoviral E1-expressing cell line），其包装流程是通过内切酶PacI将携带目的基因（Gene of Interest，简称GOI）的转移质粒线性化。线性化的质粒DNA随后转染到包装细胞中，E1基因的表达产物激活转移质粒上的腺病毒基因的表达（E3基因的缺失不影响腺病毒的包装），产生重组腺病毒颗粒。此时生产出来的为粗制的腺病毒。 | 第1-6天 |
Virus amplification | 粗制的腺病毒再次转导到在包装细胞中进行扩增。 | 第7天 |
Concentration and purification | 对于非纯化的腺病毒，腺病毒可以被细胞直接分泌到培养基中，然后进行收集。对于超纯化腺病毒，则还需要进一步的氯化铯（CsCl）密度梯度离心进一步纯化和浓缩。 | 第24天 |
Quality Control | 对于每一个我们生产的腺病毒，质量控制均包括基于免疫细胞化学染色（ICC）的滴度测定（Titer determination）、微生物（细菌和真菌）检测（Bioburden test）和支原体检测（Mycoplasma test）。 若转移载体同时编码一个荧光蛋白，我们还会将病毒进行细胞转导以测定相应的荧光表达情况（Transduction test）。此外，对于超纯化腺病毒，我们还可以检测内毒素水平（Endotoxin test）。 | 第28天及以后 |
我们的滴度保证仅适用于包装进病毒的区域（从5’ ITR 到3’ ITR）小于腺病毒承载限度（38.7 kb，~野生型HAd5基因组长度36 kb的108%）的载体。超过该范围，超出的那部分序列在包入衣壳时会被剪切掉，导致包装出来的腺病毒颗粒含有不完整的genome。此外，对于如下载体，我们同样不能保证滴度:
包含对包装过程有不利影响的序列，例如毒性基因（如促凋亡基因）；破坏包装细胞或病毒的完整性（如导致细胞聚集的膜蛋白）的基因 ；易于重排或者产生二级结构的序列（如重复序列或者高GC含量序列）。
⽤户提供的载体，因为我们无法控制载体质量。
如需客户提供慢病毒载体，则请按照外来物品接收指南将载体寄送给我们。请严格按照我们的指南来进行装运以免造成物品的任何延误和损坏。客户提供的所有材料均需经过QC检测，每一份材料附加检测费用。请注意，客户提供物品接收并通过QC之后生产才正式开始。
周期是指订单接受到发货之间的时间。不包括需要客户提供任何物料（如病毒载体）的等待时间。
| 货号 | 名称 | 品牌 | 购买 |
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粤公网安备 44010602000473号
粤ICP备09063491号
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