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美国RainDance皮升级微滴数字ddPCR系统

Raindance

Raindrop

产品概述 技术指标 应用 配套产品 精彩视频 相关资料
详细描述:
RainDance拥有成熟的RainStrom™皮液滴(picodroplet)专利技术,以该技术为基础的RainDrop™系统能够高效快速均一地制备高达1000万个皮升大小的液滴。每个液滴包裹单个PCR反应体系,通过检测反应体系最终的荧光信号强度及类型可以使研究者快速确定目标基因的浓度及基因型。

RainDrop系统还可以将来自每种标记单一颜色(single-color-per-marker)方法的现有数字PCR(dPCR)模式转换成探针强度不同的两种颜色,从而实现10个标记的多重分析。


优势

· 超高的灵敏度:
能够检出250,000个野生型分子中的1个突变,检测极限低至1/1,000,000。

 · 最高可实现10重PCR分析:
仅利用VIC和FAM两种荧光素,设置不同探针浓度可以对同一样品进行最高达10重PCR检测。

 · 灵活的反应设计:
根据您的灵敏度和待测基因数目需要来优化多重PCR反应的数量。

 · 闭管设计:
PCR反应结束后,扩增产物不开盖检测,无需担心气溶胶污染,确保检测质量。

· 成熟的皮液滴技术平台:
RainDrop™系统能够在半小时内高效均一地制备高达1000万个皮升大小的液滴。

 · 成本最低:

可以对每个待测基因待测位点给出数字答案,实现单分子绝对定量,且每一美元产生的数据要高出同类产品几个数量级。
 

操作流程简便高效

RainDrop的Source系统可以在30min时间里制备1000万个皮升大小的液滴;Sense系统可以在3.5 hours时间里将全部液滴进行荧光检测。
研究者需要做的只需要将PCR master mix 配好,其余步骤只需要将样品在不同仪器之间切换,无需更多操作步骤。




精确的结果实现绝对定量

RainDrop系统将每种标记单一颜色(single-color-per-marker)的PCR模式转换成更加扩展且精确的每种标记多色且多强度(multi-multicolor and intensity-per-marker)的方法。这种新方法检测1000万个皮升大小的液滴内单分子PCR产物荧光信号,比现有方法灵敏度提高了500-10,000倍。通过统计荧光信号类型、强度和液滴数量,研究人员可快速确定包含特定DNA目标的液滴的绝对数量,计算出不同待测基因的起始含量。

出色的灵敏度

为了评估EGFR突变的检测下限(LLOD),研究者将野生型DNA与不同浓度的突变体DNA进行混合,进行突变位点检测。在10,000,000个液滴中,其中250,000个野生型分子中混入1个突变基因都能够被检测到,稀释浓度与稀释次数成线性关系(R2 = 0.998),其LLOD为1/1,000,000,这是根据突变体比野生型比率的平均值加3倍标准偏差所计算出来的。






前所未有的多重分析dPCR

通过调整每个目的基因的探针浓度,Raindrop技术只用VIC和FAM两个荧光基团即可同时测定4个突变以及野生型基因,下图是进行5重PCR分析检测的分析图。通过调整反应条件,多重分析最高可以扩充到10重,快速而有效地进行单个DNA样品中多个突变的检测、鉴定和测定。




 
广泛应用于癌症中稀有突变检测(rare mutation detection)、拷贝数突变检测(CNV)、低频率的病毒检测以及产前检测等
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