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ClonePix 2 细胞筛选系统
Molecular Devices
ClonePix 2
ClonePix2系统使用半固体培养基培养细胞，生长出单个的细胞克隆。
细胞克隆表达的蛋白分泌到胞外和培养基里的荧光检测试剂结合。表达蛋白越多，克隆周围荧光强度越强。ClonePix2检测的不是单个时间点的荧光强度。随时细胞生长，蛋白表达的积累，软件检测的是整个培养周期内所有蛋白累积的荧光值。适用于杂交瘤的筛选以及多种稳定细胞系的筛选。
ClonePix2拥有白光和荧光两套成像系统。白光成像识别克隆，荧光成像定量检测克隆的荧光强度。软件根据每个克隆的大小，外形，距离，荧光强度等参数对克隆进行筛选。自动化机械臂可以挑取符合要求的克隆到96孔板。
ClonePix2系统可以统计计算每个克隆的平均荧光强度，根据荧光强度对所有克隆进行排列，最后只挑取荧光符合要求的克隆。这个成像、统计计算、排列的过程就是代替传统ELISA对克隆进行初步筛选的过程。最关键的是整个筛选和挑取过程完全自动化。
1使用半固体培养基培养细胞，获得独立的单个细胞克隆
2ClonePix系统可以快速筛选上万个克隆
- 大大增加找到最优克隆的概率
- 白光成像用于识别克隆位置
- 荧光成像用于定量表达水平
3多种检测方法可选
- 不用标记，直接检测杂交瘤分泌的IgG或抗原特异性MAbs
- 检测加入标记的重组蛋白或表达的荧光标记蛋白
4客观的成像分析，使用户可以准确筛选到最优表达水平的克隆，并尽可能早的排除表达水平低的干扰克隆
5准确、自动化的挑取克隆，避免出现类似有限稀释的错误
6高通量：5个荧光通道；8个独立挑头，200克隆/小时。
7高产量：和传统有限稀释方法相比，筛选克隆时间缩短一半，筛选到的克隆产量提高一倍。
8高灵活性：适用于多种细胞类型：贴壁细胞，悬浮细胞（杂交瘤，CHO，HEK，昆虫细胞等）。
9自动化：成像，筛选，挑克隆过程完全自动化。
10污染控制：封闭系统，内部紫外灯照射；100级空气过滤器；针头洗槽，加热干燥模块。
新一代细胞克隆筛选和挑取技术。能够更少时间里，自动化筛选并挑取更高水平表达的细胞克隆。拥有5组荧光通道，可以同时使用3组。避免有限稀释，快速高效筛选挑取杂交瘤克隆，建立稳定细胞株，干细胞及特殊表面标记细胞挑取及昆虫细胞筛选挑取
更少时间，筛选更多克隆
减少细胞株和抗体筛选时间
ClonePix 2系统用户在产量提高和成本节约方面都显著改善，仅单克隆生产时间就缩减50%
增加细胞系产量
因为与传统方法相比，更多的克隆在更短的时间内被筛选，从而提高分泌物产量
方法学比较 传统方法 Clonepix
筛选标准 复杂ELISA实验检测 荧光标记特异性抗体检测
工作模式 有限稀释，细胞分选等手工实验 机器全自动化操作
单位时间效率 人工低效率 ≥200个克隆/小时
筛选效率 1000细胞/8周 10000细胞/3周内仅5小时
效果 1个好细胞 5 个优质细胞
成像 ClonePix 2
软件 专用成像软件预装在高性能PC上，Win 7操作系统
白光成像 透射光：成像低对比细胞群，如，单层贴壁细胞或悬浮液中小细胞群
落射光：成像集中的细胞群
荧光成像 软件控制在5对激发/发射滤光片之间切换
(推荐：为优化性能，不要复选超过3个滤光片)
数据追踪 内部的条形码阅读器可以追踪每个试验中源板和终板数据
相机 整合16位冷CCD相机
成像速度 6孔板：5分钟/2个波长(标准条件)
分辨率 标准：28微米；最大：1.5微米
仪器
污染 完全封闭的工作环境，配有HEPA Class 100滤器
源板类型 Petri 6孔板， Petri 单孔板， Greiner 6孔板， Nunc 6孔板， Nunc OmniTray
终板类型 Petri 96孔板， Costar 96孔板， Greiner 96孔板，Nunc 96孔板，Falcon96孔板
源板载量 10块板
终板载量 10块板
挑取头 8个挑取针，每个针单独控制
挑取针大小 针头直径与应用相关，CF1用于悬浮细胞，F2用于贴壁细胞
挑取速度 >200克隆/小时
洗浴 酒精洗浴，自动重填
挑取系统液流 5L无菌水，5L废液瓶
针头干燥 专有卤素针干燥站
仪器尺寸 1010 mm (宽) x 900 mm (深) x 1490 mm (高)
仪器重量 350 kg
压缩机
压缩元件 清洁、无油压缩机，带有亚微米级滤器
尺寸 250 mm (宽) x 600 mm (深) x 750 mm (高)
重量 60 kg
最小运作压力 6 bar
最小操作体积 80 L / min
可用于筛选以下细胞类型
稳定高表达单克隆抗体/特定蛋白/重组蛋白的CHO或杂交瘤细胞株
1、 自动挑取表达量高的“高价值”细胞株
2、不再需要复杂的检测步骤
3、 无血清和有血清培养系统都适用
4、 需要的时间短：10-14天
杂交瘤中的抗原特异性克隆
1、 自动筛选和挑取杂交瘤；
2、 只挑取分泌抗原特异性1gG的克隆；
3、 不再需要后续大量的ELISA筛选工作；
4、 适用的抗原范围广，从160kD多聚体蛋白到2.6kD磷酸肽；
5、 所需要的时间短：7-10天分选100-500细胞。
稳定的干细胞，小鼠干细胞
1、 自动筛选和收集小鼠胚胎干细胞（mES）
2、 mES细胞在半固体培养基中培养，防止细胞分化和方便挑取
3、 能够发现和选择未分化的克隆
具体特定细胞表面标记的细胞
根据细胞内报告基因的表达筛选克隆（e.g. GFP）
昆虫杆状病毒筛选，杆状病毒蛋白表达系统，自动挑取琼脂糖培养基上形成的病毒斑
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