产品中心
技术交流
扫描二维码
AAV组织分布鉴定
Vectorbuilder
AAV组织分布鉴定
重组AAV病毒近年来已成为用于基因治疗和疫苗开发的热门基因递送载体。在早期临床研究中，为测试AAV载体在体内的可靠性和安全性，一个关键的问题便是需要鉴定其在多种器官和组织中的分布情况与留存时长。
目前虽有一些研究报道了常用血清型的 AAV的组织分布模式，但是这些研究提供的数据量上还未能达到临床应用的要求。现今的AAV组织分布鉴定方法通常仅具有器官水平的分辨率，而没有深入到亚器官水平上的不同细胞类型。而且这些研究通常只专注于使用静脉注射的方式输送AAV，同时缺乏其它给药途径的尝试。此外更显著的问题是，当前大多数实验都是在啮齿类动物身上进行的，而这些动物由于与人类在进化和生理上高度差异，从这些动物获得的数据结果令人怀疑是否同样适用于人类。当前许多新开发血清型，包括天然的和人工合成的，完全缺乏详细的组织分布数据。令这些问题更复杂的是，鉴于不同的转基因在体内会引发有差异性的细胞反应，如先天免疫反应，即使是包装成相同血清型的不同转基因载体也会具有不同的组织分布模式。
载体家提供的AAV组织分布鉴定服务将有助于克服以上的问题，为您获得特定物种的高分辨率的AAV组织分布图像。值得一提的是，我们还可以在非人灵长类（Non-human primate，NHP）中进行该实验。从小鼠模型到猴模型，我们提供的是当前产业界物种跨度最完整的AAV组织分布鉴定服务。
后台联系客服，提交您的需求，我们的技术人员会向您发送包含价格、周期和其他相关信息在内的服务方案。
详情点击查看官网：AAV组织分布鉴定-云舟生物 (vectorbuilder.cn)
咨询电话：18127926965
全方面的服务平台：载体家是当前全球唯一一家具备AAV临床前、临床CRO和CDMO一站式服务的企业。我们的AAV相关服务涵盖载体设计、载体优化、载体克隆、文库构建、病毒包装、衣壳定向进化和工程改造、AAV组织分布鉴定、GMP病毒生产等。
使用包括非人灵长类在内的多种模式生物：我们提供一系列模式生物用于进行AAV组织分布鉴定，如小鼠、大鼠、以及重要的两种非人灵长类：食蟹猴（Macaca fascicularis）和猕猴（Macaca Mulatta）。所有体内试验均在经过AAALAC认证的机构中以专业认可的方式进行。
多种分析方法：我们提供多种方式鉴定AAV在器官、组织和细胞水平上的分布鉴定，包括报告基因荧光成像、流式细胞仪分离荧光阳性细胞、荧光素酶报告基因活性测定、qPCR测定基因组拷贝数、RT-PCR分析目的基因表达等。
使用barcode和NGS技术复合分析：许多AAV的临床前管线需要对比多种载体的组织分布，然后选择最合适的用于后续研究。这之中的情况可能有同样的基因载体用不同的血清型衣壳包裹，也可能是同样的一个血清型衣壳包裹了不同的基因载体。载体家开发的专有平台可以在同个物种中鉴定不同AAV基因载体的组织分布。具体而言，每个基因载体均带有一个barcode。在给定组织中，通过NGS测定这些barcode就能鉴定这些AAV载体的基因组DNA或mRNA在组织中的分布模式。该方法可以显著地减少鉴定的成本和时长，更关键的是，该方法允许在组织中转导高丰度的互为内参的不同类型载体，从而增加了数据的灵敏度和可靠性。
可提供多种AAV血清型：我们提供一系列常用的血清型衣壳用于包装您的AAV载体（血清型1-9、rh10、DJ、DJ/8、PHP.eB、PHP.S、AAV2-retro、AAV2-QuadYF和AAV2.7m8）。我们还能根据您的需求快速开发新的血清型。
多途径给药：我们可使用多种方式注射AAV，如尾静脉注射、面静脉注射、脑室内注射、鞘内注射、视网膜下注射、玻璃体内注射、鼓室内注射和肌肉注射等。
完善的技术支持：我们的科学家在AAV项目上具有深厚的经验，能够为您提供全面的技术支持，包括载体设计、病毒包装、GMP生产、细胞培养分析以及动物手术等。
以下数据为我们测试的不同血清型AAV在多种组织中的分布情况：
图1 小鼠多种方式注射AAV9-CAG-EGFP，对多种器官组织取材、制备冷冻切片，激光共聚焦显微镜观察：（A）内耳，左耳鼓室内注射后第13天；（B）海马和脊髓前角，面静脉注射后第10天；（C）视网膜、肝、胰腺和骨骼肌，尾静脉注射后第12天。
图2 小鼠尾静脉注射AAV1-CMV-EGFP。注射后第12天，处死取材，制备冷冻切片。激光共聚焦显微镜观察。
图3 小鼠视网膜下注射AAV8。注射后第20天，处死取材，制备冷冻切片。激光共聚焦显微镜观察。（A）AAV8-ProA1-mCherry（B）AAV8-hRHO-EGFP。
图4 向出生48小时的新生鼠（2只雄性、1只雌性）静脉注射AAV9（~1.5x1010 GC）。注射第六周后，qPCR检测小鼠各个器官中的AAV拷贝数。
技术指标
应用
| 货号 | 名称 | 品牌 | 购买 |
|---|
粤公网安备 44010602000473号
粤ICP备09063491号
营业执照
