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哺乳动物基因表达腺病毒载体

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产品概述

亮点

我们的载体来源于血清5型腺病毒(Ad5)。经优化,该载体在大肠杆菌体内具有很高的拷贝数,包装出来的病毒具有高滴度,能有效转导靶细胞,实现外源基因的高水平表达。

优势

对宿主基因组造成破坏的低风险性:在转导进入靶细胞后,腺病毒载体在细胞核保持着游离DNA的状态,可以降低宿主基因组被破坏而致癌的风险,使其成为人类体内实验的理想载体。

超高病毒滴度:腺病毒可通过再次转导包装细胞而得到大量扩增,从而获得超高滴度病毒,慢病毒载体、逆转录病毒载体和AAV载体都不具有这个特性。我们提供的腺病毒滴度可以达到>1012 VP/ml。

宿主范围广泛:来源于人、小鼠和大鼠等常用哺乳动物细胞都能被腺病毒载体转导,但某些细胞类型则比较难转导(见下文不足之处)。

载体容量大:腺病毒能有效包装的基因组上限大小是〜38.7 kb(从5' ITR到3' ITR)。在除去腺病毒包装表达所需主要元件所占用的容量之后,我们的载体具有约〜7.5 kb的装载空间以容纳目的DNA(例如启动子,ORF和荧光标记)。相比起容量为6.4 kb的慢病毒表达载体,腺病毒载体容量更大,能满绝大多数应用要求。

体内外实验均有效:我们的载体不仅能用于体内活体动物实验,还具有体外细胞转导能力。

安全性:为了确保腺病毒载体的生物安全性,我们的腺病毒载体缺失了病毒包装所必须的基因(这些基因被整合到包装细胞的基因组)。 所以,利用我们的腺病毒载体包装出来的病毒是复制缺陷型的,并且只有在包装细胞中才具有复制能力。

不足之处

载体DNA非整合型:腺病毒基因组不会整合到靶细胞的基因组中,而是以游离DNA的形式存在,并且随着时间推移逐渐丢失,特别是在分裂细胞中。

难以转导特定类型的细胞:虽然我们的腺病毒载体可以转导很多类型的细胞包括非分裂细胞,但对某些特定类型的细胞如内皮细胞、平滑肌细胞、呼吸上皮分化细胞、外周血细胞、神经元和造血干细胞等,却无法进行有效的转导。

较强的免疫原性:活腺病毒会在动物体内引起强烈的免疫反应,从而限制了其在体内的某些应用。

技术复杂:使用腺病毒载体时,需要在包装细胞中产生活病毒,然后测定病毒滴度。这些过程技术难度更高,周期更长。


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