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CD63+外泌体分离试剂盒(纯化柱法)
珀罗汀生物
EV0603013
外泌体是细胞分泌的直径约为 30-150 nm 的小囊泡,广泛存在于细胞培养上清液以及血液、唾液、 尿液等生物体液中。外泌体携带有核酸、蛋白质、脂质等重要信息,在疾病诊断、靶向治疗、再生医学 等方向具有广泛应用。
本试剂盒基于核酸适体亲和技术,可从细胞培养上清液或体液样本中特异性地分离分离出高纯度的 CD63 +外泌体,具有精准捕获、操作便捷等特点,可用于下游的电镜分析、Western Blotting、荧光定量 PCR 和高通量测序等应用。
适用范围
本试剂盒适用于细胞培养上清液或体液样本(血清、尿液等)。
产品组分(5 T/10 T/25 T)
产品货号 | 组分名称 | 数量/体积 |
EV0603013 | EPC | 5/10/25 支 |
CB powder | 5/10/25 支 | |
Release Buffer | 0.15/0.3/0.75mL | |
Buffer A | 2.5/5/12.5 mL | |
Buffer B | 1.5/3/7.5 mL |
操作步骤(以细胞培养液上清为例)
一、样品预处理
取细胞培养液上清,在 4℃条件下,300 × g 离心 10 min;2000 × g 离心 20 min;12000 × g 离心 30 min 或使用 0.22 μm 针孔滤膜过滤得到细胞上清样品;
二、外泌体捕获
1. 每管 CB powder (全称为 Capture Buffer powder)加入 100 μL ddH2O,轻轻吹打使其充分溶解,避免剧烈振荡,有少量沉淀不溶为正常现象,不影响使用;
2. 取外泌体纯化柱 EPC(全称为 Exosome purification column),加入 500 μL Buffer A 进行柱平衡,10000 × g 离心 1 min,弃去下层分离液;
3. 将 100 μL 样品加入复溶后的 CB powder 管中,轻轻吹打混匀,将其转移至 EPC,随后置于 37 ℃, 450 rpm 反应 45 min,10000 × g 离心 1 min,弃去下层液体;
4. EPC 中加入 100 μL Buffer B 清洗,10000 × g 离心 1 min,弃去下层清洗液,重复清洗 3 次;
5. EPC 中加入 30 μL Release Buffer ,置于 37 ℃,450 rpm 反应 45 min,10000 × g 离心 1 min 获得 CD63 +外泌体溶液。
注意事项
本产品应避免反复冻融。
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本产品仅供专业人员科学研究使用,请勿用于人体及动物或作为食品、药品、化妆品的添加剂等用途。
储存条件
Release Buffer在-20 ℃保存,有效期6个月。
其余试剂4 ℃保存,有效期6个月。
应用
| 货号 | 名称 | 品牌 | 购买 |
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