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D-萤光素钾盐
Chaselection
CY057F0100等，详见产品详情页
D-萤光素是萤光素酶的常用底物，在Mg2+、ATP存在条件下与萤光素酶发生反应，生成二氧杂环丁烷结构，并产生发光现象。在萤光素过量条件下，产生的光子数与酶的浓度呈正相关性。这类发光反应可用于启动子优化，药物筛选，细胞ATP水平分析等实验。
D-萤光素钾盐拥有较好的水溶性和脂溶性，相较于D-萤光素（游离酸）能更好应用于体外活细胞和体内活体生物发光成像等研究。
产品性质：
产品别名 | D-萤光素钾盐； 5-氟-萤光素 |
CAS号 | 115144-35-9 |
分子式 | C11H7N2KO3S2 |
分子量 | 318.4 |
外观 | 淡黄色粉末 |
溶解性 | 易溶于水 |
纯度（HPLC） | ≥99% |
产品用途：
报告基因分析
细胞体外生物发光分析
体内活体成象分析
高灵敏度ATP分析
其他萤光素酶及其基因相关的研究
贮存条件及效期：
-20℃避光干燥保存，有效期1年。冰袋运输。
工作液现配现用，储存液-20℃分装储存，避免反复冻融，在3个月内使用。
使用说明：
1. 体外生物发光分析
1）储存液的制备
将1.0g D-萤光素钾盐溶解于33.3mL 无菌水中配制成30mg/mL的储存液，或配制单次实验所需的D-萤光素钾盐溶液。
2）体外活细胞生物发光检测
a. 接种外源过表达萤火虫萤光素酶的细胞在培养板上；
b. 将配制好的D-萤光素钾盐储存液用细胞培养基稀释成150μg/ml的工作液；
c. 移除细胞培养板中培养基，加入D-萤光素钾盐工作液于37°C孵育10min后用于细胞成像。
2. 体内活体成像分析
1）D-萤光素钾盐溶液制备
将1.0g D-萤光素钾盐在DPBS（w/o Ca2+,Mg2+）中溶解配制成15mg/mL，或配制单次实验所需的D-萤光素钾盐溶液，使用0.2 μm滤膜过滤除菌。
2）体内活体生物发光的检测
a. 以10μL/g体重确定注射量。每只小鼠接受150 mg D-萤光素钾盐/kg体重（如对于体重为10 g的小鼠，需要注射100 μL以提供1.5 mg D-萤光素钾盐）；
b. 在活体成像前10-15min腹腔注射D-萤光素钾盐溶液，或根据动力学曲线确定具体时间。
3. 模型动物萤光素酶活性的动力学曲线
1) 将D-萤光素钾盐以15mg/ml溶解于DPBS（w/o Ca2+,Mg2+）中，腹腔注射，工作剂量为150mg /kg。
2) 等待3min，然后给动物进行常规麻醉(气麻、针麻皆可)；
3) 将麻醉后的动物放置在成像室并拍摄第一张图像。
4) 每5-10min连续拍照，持续40min，获得模型动物的D-萤光素钾盐吸收动力学曲线。
5) 根据动力学曲线确定最佳成像时间。
注意事项：
1）最佳成像时间受注射方式、动物类型以及体重等的影响，因此建议每次实验都要做萤光素酶动力学曲线，以确定最佳信号平台期和最佳检测时间。
2）如果要进行ATP相关检测，尽量避免外源ATP的污染，如操作时戴手套并使用ATP-free的实验耗材，在进行萤光素的溶解时应使用ATP-free无菌水。
3）本品需进行避光操作和保存。储存液过滤除菌后可分装于-20℃或-80℃冻存。如果有条件，可对储存液充入氮气或氩气（防止氧化）。
4）在进行D-萤光素钾盐的溶解时，应使用无钙镁离子的DPBS，钙镁离子可能会抑制萤光素酶的活性，此外镁离子可能会对萤光素的氧化造成影响，从而影响检测。
5）本产品仅作科研用途！
订购信息：
技术指标
应用
| 货号 | 名称 | 品牌 | 购买 |
|---|
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粤ICP备09063491号
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