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AquaMax微孔板洗板机加LifeSep磁力架可应用于MAGPIX多重磁珠检测平台

2013-03-19

 
AquaMax2000/4000微孔板洗板机加LifeSep磁力架可应用于MAGPIX多重磁珠检测平台
 
简介:
众所周知MAGPIX多重磁珠检测系统具有高通量多通路的检测特点,可以在一小时内得出4800个分析结果。为了确保得到最佳试验结果,试验优化的关键步骤是如何在清洗过程中最大程度的减少微孔板中磁珠损失,从而提高MAGPIX磁珠的清洗效率。Molecular Devices公司推出的AquaMax2000/4000微孔板洗板机,能够有效的降低微孔板中磁珠的损失率,按照本文所示针对该仪器进行优化设置后,其微孔板中磁珠的损失率将小于5%(图一)。
 

图一:AquaMax4000微孔板洗板机和LifeSep磁力架可应用于MAGPIX多重磁珠检测系统

材料:

  • MAGPIX校准试剂盒(Life Technology,Cat.#MPX-CAL-K25
  • 磷酸盐缓冲液(PBS
  • LifeSep 96F磁力架(Dexter Magnetic Technology, Cat.#2501008-1
  • 96孔全透明微孔板(Greiner
  • ®VelosTM 高内涵系统(Molecular Devices

 

方法:

步骤一:按1:50比例稀释磁珠于PBS中,96孔板中每孔加入100ul磁珠混合液

步骤二:洗板前先将微孔板放入ImageXpress Velos上成像,获得磁珠数目

步骤三:对AquaMax微孔板洗板机设置:软件中创建一个新微孔板参数,选择Greiner 96孔板,高度输入24.2mm(正常微孔板的高度+10mm LifeSep磁力架高度),使用仪器自带的微孔板深度自动探测功能,可以精确地检测出微孔板的深度,保存检测数据于程序中

步骤四:使用PBS清洗在AquaMax4000洗板机上的微孔板,洗板机按下面参数进行设置建后,会得到最佳结果(能够有效减少清洗过程中磁珠的损失)

吸液

  • 位置:边缘
  • 洗头吸液速率:中速
  • 洗头下降速度:3
  • 高度:5mm

分装

  • 体积:150ul
  • 洗头分液速率:5
  • 从第一步开始重复2
  • 吸液(如上所设置)

使用ImageXpress Velos高内涵系统所带532nm波长的激光光源扫描绿色荧光信号,软件分析后,可以得到微孔板清洗前后每孔中磁珠数目。

清洗前96孔板中每孔磁珠数目

每孔中的磁珠平均数=615

 

清洗后96孔板中每孔磁珠数目

每孔中的磁珠平均数=585

保留率=95.1%

 

图二:微孔板中选取一个孔成像,对比清洗前后的结果 

清洗前                                           清洗后

选取D5                                        选取D5

磁珠数目:633                                磁珠数目:605

结论:

清洗过程中能够有效降低磁珠的损失率是保证MAGPIX试验成功的关键因素,当AquaMax微孔板洗板机清洗96孔板中的MAGPIX磁珠时,使用LifeSep磁力架,按照上面所述进行仪器设置后,超过95%的磁珠保留在微孔板中。AquaMax微孔板洗板机所具有高度自动调节和洗头可换的功能,确保了其能够灵活的适应各种试验的要求。