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mRNA纯化挑战大?带你领略POROS Oligo(dT)25亲和填料的威力

2022-04-26

随着FDA批准了美国公司Moderna研发的新冠肺炎疫苗mRNA-1273的紧急使用授权,基于mRNA的治疗方法越来越引起大家的兴趣,其应用的范围也越来越广泛,包括肿瘤、干细胞治疗及感染性疾病等。然而,获得大量可用于临床的mRNA产品依然是一个很大的挑战。现阶段的mRNA生产制备依然需要很多纯化步骤,使用大量的有害试剂,因此对于大规模的生产下游的纯化始终是一个瓶颈。赛默飞为打破这一瓶颈,特开发出一款mRNA亲和层析填料。

赛默飞POROS Oligo(dT)25亲和填料特性:

• 通过AT碱基配对轻松捕获mRNA

• 使用简单:NaCl上样, 用水洗脱

• 4000 bp mRNA的动态结合能力高达5mg/mL

• 回收率>90%

• 出色的放大性

• 无动物源性

mRNA纯化挑战大?带你领略POROS Oligo(dT)25亲和填料的威力

图1.POROS Oligo(dT)25亲和填料由脱氧胸腺嘧啶核苷(dT-25)配体组成,

并通过特有的linker连接到POROS基质上

因此,应用POROS Oligo(dT)25纯化mRNA工艺路线可设计如下:

mRNA纯化挑战大?带你领略POROS Oligo(dT)25亲和填料的威力

该亲和填料洗脱操作简单,具有出色的收率和纯度表现。下图展示了从体外转录混合物(IVT)中纯化2000bp的mRNA。即使在过载条件下,洗脱仍然非常简单高效,使用H2O洗脱,回收率均>95%。

mRNA纯化挑战大?带你领略POROS Oligo(dT)25亲和填料的威力

与Spin柱相比,该亲和不仅载量更高,而且纯度也更好。下图展示了mRNA使用不同纯化方法后HPLC分析的的纯度,POROS Oligo(dT)25对杂质有较大幅度的去除。

mRNA纯化挑战大?带你领略POROS Oligo(dT)25亲和填料的威力

赛默飞新产品POROS™ Oligo(dT)25亲和填料解决了基于mRNA的疗法中大规模纯化mRNA当前所面临的挑战。使用该填料可以:

➢ 简化您的mRNA纯化过程并降低后续精纯步骤的复杂性

➢ 提高纯度和收率

➢ 无需使用有毒化学试剂即可实现mRNA的纯化放大


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