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全能核酸酶你会用吗——核酸酶使用小贴士(三)

2022-12-29

这一篇,我们为大家带来更深入的核酸酶使用技巧!和大家一起探讨如何在实际使用中更好地调整我们的实验方法,让核酸酶发挥最大的作用!本篇主要在尿素变性条件使用、低温环境以及核酸酶灭活与去除等几个问题上做出解答。

 

典型应用:

新冠灭活疫苗生产过程中宿主DNA的去除

传统疫苗工艺纯化过程中去除宿主核酸

细胞或基因治疗病毒载体制备流程宿主核酸的去除

重组蛋白纯化或组织细胞样品蛋白提取时去除核酸污染

与细胞或细菌裂解液配合使用,去除粗提物中的核酸,降低溶液粘性,提高蛋白产量

减少存放的外周血单细胞(PBMC)的结块现象)

 

让我们来看看Pannarse全能核酸酶在使用上更深入的一些小介绍吧!

 

1. 当蛋白溶解性差需要变性变性环境对核酸酶有影响吗?

常见的变性条件下一般会使用高浓度尿素。Pannarase核酸酶在尿素浓度6M时,随着时间延长活性会逐渐减少。在7M尿素浓度下,核酸酶15min后出现变性失活,但在酶失活前多数核酸已降解,可通过提高核酸酶浓度补偿高浓度尿素影响。

 

 

2. 当反应温度低于37℃时,如何保证核酸酶消化效果?

体系固定的情况下,核酸酶消化效果取决于酶用量、反应温度和反应时间。当反应温度较低时,为避免过多的核酸酶引起的残留问题,更加推荐延长反应时间来保证消化效果。

 

怎样灭活Pannarase核酸酶?如何去除?

采用EDTA螯合金属离子会可逆地抑制核酸酶活性,极端条件会造成不可逆失活,例如100mM NaOH70℃处理30min等。核酸酶可采用阴离子交换柱从目的产物中分离出去。

 

关于常用反应液和减少用量 ,你应该知道~~

常用生物缓冲液,如TBSMOPSpH6-8)等。如需减少用量,可酌情提高反应温度或延长时间。

 

以上是我们关于核酸酶使用的更深一步的技巧介绍,后续我们会持续更新为您的实验提供更多参考,敬请关注!

 

相关产品信息:

Pannarase全能核酸酶五大特点:

1. 杰出的比酶活,更高效的核酸降解能力

2. 规范的液相标准品定量,出色的质谱均一性认证

3. 严格的质控标准,确保单位酶活的准确性以及批次间稳定性

4. 无动物源性物料

5. 先进的生产工艺,非传统His标签纯化,排除引入金属离子风险

 

Pannarase全能核酸酶订购信息

 

货号

名称

规格

CYG002F0010

Pannarase全能核酸酶

100,000 U

CYG002F0050

Pannarase全能核酸酶

500,000 U

CYG002F0500

Pannarase全能核酸酶

5,000,000 U

CYG003RKIT

Pannarase全能核酸酶ELISA检测试剂盒

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