病毒疫苗的生产、细胞治疗与基因治疗等领域均可能会用到病毒,对其质量进行控制对于保障上述产品的安全性和有效性具有及其重要意义。其中HCD残留可能会传递肿瘤或病毒相关基因,造成潜在的危险性,因此,去除宿主核酸或在最大程度上降低其残留刻不容缓。
逐典Pannarase全能核酸酶是一种来源于Serratia marcescens的非特异性核酸内切酶,该酶可以将任何形式的 DNA 和 RNA (线性、环形、超螺旋)降解成3-5bp的寡核苷酸,并可在一系列宽泛的操作条件下保持高效性。
接下来小编就带您
一起了解
在病毒纯化过程中
如何正确使用全能核酸酶
全能核酸酶的酶活会受到多种因素的影响(例如温度、pH、离子强度等),故用量范围也会从0.1 U/mL-250 U/mL不等。因此,不同的操作环境下酶的最佳浓度不同,需要通过实验设置梯度进行最佳条件的摸索。
以下是文献中具体的应用实例:
1. 样品:狂犬病毒浓缩液
处理条件:核酸酶浓度50~90U/ml ,
37 ℃处理 2 h,转入18 ~ 26 ℃处理 6h
2. 样品:狂犬病病毒浓缩液
处理条件:25、50和100 U/ml,37℃
3. 样品:流感病毒浓缩液
处理条件:10 U/mL,37℃
参考文献
[1] 崔燕平. 非限制性核酸内切酶对狂犬病疫苗中Vero细胞DNA的去除作用[J]. 中国生物制品学杂志, v.27(04):444-447.
[2] 刘杰,刘辉,杨会强,康庄,孙艳,毛川成,何敏,李玉华.多种方法结合去除冻干人用狂犬病疫苗中Vero细胞残留DNA[J].中国生物制品学杂志,2013,26(12):1827-1830.
[3] 阮朝列,施锦丽,李卫东等.Benzonase核酸酶在Vero细胞流感病毒灭活疫苗中的应用研究[J].病毒学报,2023,39(04):980-990.