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关于重组胰蛋白酶，你了解多少？
重组胰蛋白酶研究背景
胰蛋白酶是一种可以特异性水解肽链中的赖氨酸和精氨酸C‐端肽键的丝氨酸蛋白酶。在生物制品生产过程中作为一种重要的生物源性材料，广泛应用于病毒性疫苗、生物技术产品以及其他医疗产品的生产制造，例如，流感病毒疫苗中病毒颗粒的激活、疫苗生产中动物细胞的传代培养、胰岛素单链前体转化为双链胰岛素等。目前国内的疫苗及胰岛素生产企业仍然是以动物源性胰蛋白酶（从猪或牛胰腺中分离纯化获得）为主，但会存在生产工艺复杂、潜在的人畜共患性病原污染的风险。近年来，由于生产过程中使用动物源性胰蛋白酶导致生物制品被外源因子污染案例时有发生，引起了人们对生物制品使用胰蛋白酶安全性的广泛关注。随着疫苗产业的不断发展，胰蛋白酶的市场需求量也稳步上升。此外，生物制品生产所需原辅料的安全性越来越受到重视和关注，无动物源性原辅料替代动物源性原辅料已成为必然趋势。利用基因工程菌表达的重组胰蛋白酶因其纯度高，安全性好，理化性质稳定等优点受到越来越多的青睐。
重组胰蛋白酶来源和形式
重组胰蛋白酶是利用DNA重组技术在大肠杆菌中表达的重组猪胰蛋白酶，其氨基酸序列与猪胰蛋白酶完全一致，是由223个氨基酸构成，含有6对二硫键。包含两种胰蛋白酶活性形式：α‐胰蛋白酶（相对分子质量23481）和β‐胰蛋白酶（相对分子质量23463）。具有活性的重组胰蛋白酶的空间构象表面暴露出精氨酸和赖氨酸，因此容易发生自水解，使得单链β‐胰蛋白酶通过自水解的形成双链α‐胰蛋白酶，α‐胰蛋白酶通过其内部二硫键维持结构，但其活性及稳定性均低于β‐胰蛋白酶。可替代传统提取胰酶用于疫苗、干细胞、免疫细胞治疗、药物筛选、抗体等领域细胞消化过程。
逐典重组胰蛋白酶是一款满足药典要求的GMP级非动物源胰蛋白酶
Trypelectase 重组胰蛋白酶是逐典生物专门为疫苗、病毒载体生产设计，具有高效、非动物源和高质量标准的特点。该胰蛋白酶氨基酸序列与猪胰腺来源的胰蛋白酶一致，由大肠杆菌(E.col) 重组表达生产。在GMP级别环境中生产的重组胰蛋白酶能高效消化贴壁细胞且不造成伤害，产品质量满足药典要求。
逐典重组胰蛋白酶特点
1.GMP级生产环境、符合药典标准
2.重组生产、不含杂酶
3.批量生产、质量稳定
4.高纯度、高比活
5.非动物源原料
逐典重组胰蛋白酶应用场景
组织块的消化解离和原代细胞的获取、贴壁细胞的传代消化和收获、微载体方法培养的细胞消化和收获。
实验数据
CT26.WT 和 HEK293FT 细胞消化实验
CT26WT和HEK293FT在经Trypelectase重组胰酶消化3min后解离效果较好，细胞活率显示对细胞伤害较小，不会影响细胞传代。
Trypelectase重组猪胰酶对细胞消化过程及传代24h细胞贴壁图
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