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全能核酸酶-纯化细胞治疗产品、抗体药物及疫苗的利器 核酸酶介绍
核酸酶是在核酸分解的第一步中，作用于水解核苷酸之间的磷酸二酯键的一种蛋白质。在高等动植物中都有作用于磷酸二酯键的。 不同来源的核酸酶，其专一性、作用方式都有所不同。有些核酸酶只能作用于RNA，称为核糖核酸酶（RNase），有些核酸酶只能作用于DNA，称为脱氧核糖核酸酶（DNase），有些核酸酶专一性较低，既能作用于RNA也能作用于DNA，因此统称为核酸酶（nuclease）。根据核酸酶作用的位置不同，又可将核酸酶分为核酸外切酶（exonuclease）和核酸内切酶（endonuclease）。
20世纪70年代，在细菌中陆续发现了一类核酸内切酶，能专一性地识别并水解双链DNA上的特异核苷酸顺序，称为限制性核酸内切酶（restrictionendonuclease，简称限制酶）。当外源DNA侵入细菌后，限制性内切酶可将其水解切成片段，从而限制了外源DNA在细菌细胞内的表达，而细菌本身的DNA由于在该特异核苷酸顺序处被甲基化酶修饰，不被水解，从而得到保护。
核酸外切酶
有些核酸酶能从DNA或RNA链的一端逐个水解下单核苷酸，所以称为核酸外切酶。只作用于DNA的核酸外切酶称为脱氧核糖核酸外切酶，只作用于RNA的核酸外切酶称为核糖核酸外切酶；也有一些核酸外切酶可以作用于DNA或RNA。核酸外切酶从3′端开始逐个水解核苷酸，称为3′→5′外切酶，例如，蛇毒磷酸二酯酶即是一种3′→5′外切酶，水解产物为5′核苷酸；核酸外切酶从5′端开始逐个水解核苷酸，称为5′→3′外切酶，例如：牛脾磷酸二酯酶即是一种5′→3′外切酶，水解产物为3′核苷酸。
核酸内切酶
核酸内切酶催化水解多核苷酸内部的磷酸二酯键。有些核酸内切酶仅水解5′磷酸二酯键，把磷酸基团留在3′位置上，称为5′-内切酶；而有些仅水解3′-磷酸二酯键，把磷酸基团留在5′位置上，称为3′-内切酶。还有一些核酸内切酶对磷酸酯键一侧的碱基有专一要求，例如胰脏核糖核酸酶（RNaseA）即是一种高度专一性核酸内切酶，它作用于由嘧啶核苷酸C‘3处的羟基与下一个核苷酸C5’处的磷酸形成的3‘，5’-磷酸二脂键，产物为以3′嘧啶核苷酸结尾的低聚核苷酸和以5’核苷酸开头的低聚核苷酸。
非特异性核酸酶
20世纪五六十年代，金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等分泌的胞外核酸酶也被陆续分离出来。底物测试发现这些酶对DNA和RNA表现出非专一性，因此被新归类为非特异性核酸酶。
逐典Pannarase全能核酸酶是一种来源于Serratia marcescens的非特异性核酸内切酶，该酶可以将任何形式的 DNA 和 RNA (线性、环形、超螺旋)降解成3-5bp的寡核苷酸，并可在一系列宽泛的操作条件下保持高效性。逐典全能核酸酶从E.coli中表达纯化并在GMP条件下生产，可高效去除各种样品中的核酸杂质，助力解决广大疫苗生产、基因和细胞治疗厂商解决产品的核酸残留问题；此外某些病毒生产中可能会涉及到高盐的环境，逐典Pannarase耐高盐全能核酸酶将成为您“疑难杂症”的最佳选择！
全能核酸酶优势：
1.无动物源性、无氨苄青霉素
2.杰出单位比酶活、更高效的核酸降解能力
3.先进的生产工艺，非传统His标签纯化、排除引入金属离子风险
4.严格的质控标准，内毒水平低，确保单位酶活的准确性以及批次间稳定性
全能核酸酶应用条件：
全能核酸酶的酶活会受到多种因素的影响（例如温度、pH、离子强度等），故用量范围也会从0.1 U/mL-250 U/mL不等。因此，不同的操作环境下酶的最佳浓度不同，需要通过实验设置梯度进行最佳条件的摸索。
应用实例：
1.样品：狂犬病毒浓缩液
处理条件:核酸酶浓度50~90U/ml ,
37 ℃处理 2 h,转入18 ~ 26 ℃处理 6h
2.样品：狂犬病病毒浓缩液
处理条件：25、50和100 U/ml，37℃
3.样品：流感病毒浓缩液
处理条件：10 U/mL，37℃
参考文献
[1] 崔燕平. 非限制性核酸内切酶对狂犬病疫苗中Vero细胞DNA的去除作用[J]. 中国生物制品学杂志, v.27(04):444-447.
[2] 刘杰,刘辉,杨会强,康庄,孙艳,毛川成,何敏,李玉华.多种方法结合去除冻干人用狂犬病疫苗中Vero细胞残留DNA[J].中国生物制品学杂志,2013,26(12):1827-1830.
[3] 阮朝列,施锦丽,李卫东等.Benzonase核酸酶在Vero细胞流感病毒灭活疫苗中的应用研究[J].病毒学报,2023,39(04):980-990.
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