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上海逐典生物科技有限公司

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掌握D-萤光素钾盐使用方法,轻松提升实验效果!

2024-03-21

一. 体外生物发光检测

1)用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐,配制成30mg/mL的储存液 (100-200×) ,混匀。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。

2)用预热好的组织培养基将储存液稀释至0.15-0.3mg/mL的工作液浓度。

3)去除细胞培养基。

4)待图像分析前,向细胞内添加荧光素工作液,37℃孵育5-10 min,然后进行图像分析。

二. 体内活体成像分析

1)用无菌的DPBS (w/o Mg2+、Ca2+) 配制15 mg/mL的荧光素的储存液,混匀。

2)用0.2 µm滤膜过滤除菌。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。

3)腹腔注射(i.p.),按照150 mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射,以小鼠为例,每只小鼠体重假定20g,每只小鼠用量3mg;

4)注射入体内10-15 min(待光信号达到最强稳定平台期)后进行成像分析。

注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

三,逐典D-萤光素钾盐优势

1.高纯度(HPLC验证纯度≥99%)

2.优异的生物发光性能

3.高溶解度(>40mg/ml)

四,应用场景

D-荧光素钾盐在不同领域具有多种应用场景。其中包括蛋白表达研究、抗肿瘤或抗病毒药物研究以及mRNA疫苗开发等。

蛋白表达研究:将Luc基因插入需要研究的蛋白中,可用于定量目标蛋白在实验动物体内的表达情况。

抗肿瘤或抗病毒药物:在肿瘤细胞或病毒中导入Luc基因,建立肿瘤或病毒感染小鼠模型,注射药物后,通过活体成像技术观测肿瘤大小或病毒感染的变化。

mRNA疫苗开发:在mRNA中插入Luc基因,脂质体包裹后注射实验动物后,可通过活体成像技术可观测疫苗的免疫效果。

五,应用案例分享