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荧光素酶报告基因如何助力GLP-1RA 药物活性检测
荧光素酶报告基因在检测GLP-1RA(胰高血糖素样肽-1受体激动剂)药物活性中起到了关键作用。以下是其应用原理:
首先,荧光素酶报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)活性的一种报告系统。当荧光素酶与荧光素底物反应时,会发出生物荧光,这种荧光信号的强度与荧光素酶的活性成正比。
在GLP-1RA药物活性检测中,荧光素酶报告基因系统通常与GLP-1受体(GLP-1R)的报告基因质粒结合使用。这种质粒包含了与GLP-1R基因表达相关的启动子序列,使得当GLP-1R被激活时,可以驱动荧光素酶基因的表达。
具体检测步骤如下:
1,将GLP-1R的报告基因质粒与荧光素酶报告基因质粒共转染到适当的细胞系中,如293细胞。
2,将待测的GLP-1RA药物添加到细胞培养基中,使其与细胞上的GLP-1R结合并激活。
3,如果GLP-1RA药物能够成功激活GLP-1R,那么与GLP-1R基因表达相关的启动子序列就会被激活,进而驱动荧光素酶基因的表达。
4,通过添加荧光素底物并测量产生的荧光信号强度,可以评估GLP-1RA药物的活性。荧光信号的强度反映了荧光素酶的活性,进而反映了GLP-1R的激活程度。
这种方法具有高灵敏度、高特异性和操作简便等优点,使得研究人员能够更准确地评估GLP-1RA药物的活性和药效。荧光素酶报告基因在检测GLP-1RA药物活性中发挥着重要作用,为药物研发和药效评估提供了有力的工具。
CHASELECTION逐典萤光素酶报告基因检测试剂盒旨在准确、灵敏、高效地测定萤火虫萤光素酶活性,应用高通量药物筛选、药物活性检测、大规模启动子功能测定、信号通路等研究。
逐典萤光素酶报告基因
针对报告基因检测不同的侧重需求,逐典推出了3种检测系统。
逐典萤光素酶报告基因优势:
1. 检测灵敏度高,信号稳定性好
HEK293-NFK B-LUC细胞加入梯度稀释的TNF 在37C、5%CO条件下刺激6小时后,分别用增强型、超敏型、稳定型检测试剂进行信号检测。
2. 操作方便
仅需将底物和萤光素酶检测缓冲液混合后直接加入到细胞即可。
3. 稳定性好
同时在10次反复冻融实验中,逐典全系列报告基因检测试剂盒显示出较强的稳定性。