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【技术前沿】全能核酸酶:实验中的“清洁大师”

2025-07-10

 


 Vivian Chaselection逐典 2025年07月04日 17:13 


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实验中的
“清洁大师”
全能核酸酶





在细胞培养、病毒制备、蛋白纯化等实验中,残留的核酸(DNA/RNA)常干扰实验结果,甚至导致产品降解。全能核酸酶可高效降解所有形式的核酸,是实验室不可或缺的“清道夫”。







01

不同核酸酶的应用场景对比




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✅ 选择Tip:


低盐环境(如胞内蛋白提取)→ 选全能核酸酶

高盐样本(如抗体工艺)→ 选耐高盐全能核酸酶


02

推荐使用方案






01


蛋白纯化(如单抗、重组蛋白)
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用量:1–5 U/μg 蛋白

步骤:样本中加入酶,25–37℃ 孵育 15–30 min → 后续纯化

效果:减少核酸引起的柱堵塞,提高纯度

02


病毒载体生产(AAV、慢病毒)
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用量:50–200 U/ml 裂解液

作用:降解宿主细胞DNA,降低免疫原性,提升病毒滴度

03


细胞治疗产品制备


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终浓度:25–100 U/ml,处理 1–2 小时

关键点:清除残留核酸,符合药典纯度要求




03

推荐使用方案






01


温度敏感
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避免 > 37℃ 长期孵育(部分酶会失活);

长期储存需 -20℃,避免反复冻融(分装保存!)。

02


抑制剂干扰
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EDTA > 1 mM 会抑制活性 → 改用低浓度钙/镁离子激活;

变性剂(如SDS)会导致失活 → 先加酶反应后再变性。

03


残留去除
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下游需无菌/无酶环境时,可通过离子交换层析或超滤去除酶




04

逐典生物全能核酸酶






逐典生物依托重组蛋白定向改造平台,基于AI酶进化能力,成功开发多款全能核酸酶,酶活性高,终产物回收率高,能够特异性适配不同应用场景,在病毒纯化、疫苗生产、蛋白和多糖类制药工业作为宿主残留核酸去除试剂,有效去除宿主残留核酸,保证生物制品功效及安全性。


01


产品特点
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1. 高酶活性:中、高盐缓冲液条件下,酶活性高

2. 高回收率:高盐环境下减少核酸缠绕病毒或目的蛋白,降低AAV等病毒颗粒聚集,提高目的产物回收率

3. 高工艺简便性:下游收获或纯化无需超滤换液或透析脱盐

02


性能验证数据
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Pannarase全能核酸酶


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图1.Pannarase全能核酸酶酶切数据


Pannarase耐高盐全能核酸酶


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图2.Pannarase耐高盐全能核酸酶耐盐曲线


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图3.Pannarase耐高盐全能核酸酶酶切数据


Pannarase在150 mM Na+浓度条件下酶活性最高,300 mM时仍有36.2%的活性


 Pannarase耐高盐全能核酸酶(SAN),更高盐耐受型


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图4.Pannarase耐高盐全能核酸酶(SAN),更高盐耐受型耐盐曲线


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图5.Pannarase耐高盐全能核酸酶(SAN),更高盐耐受型酶切数据


Pannarase耐高盐全能核酸酶(SAN),更高盐耐受型在600~700 mM Na+浓度条件下酶活性最高


03


产品推荐


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