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详细描述:
核酸分子杂交组织 (或细胞)化学技术其基本原理是两条核苷酸单链片段在适宜的条件下通过氢键结合,形成 DNA-DNA、DNA-RNA或RNA-RNA 双链分子的特点,把带有标记的(有放射性核素,如H3、S35、P32及荧光素、生物素、地高辛等非放射性物质)DNA或RNA片段作为核酸探针,与组织切片或细胞内待测核酸(RNA或DNA)片段进行杂交,然后可用放射自显影等方法予以显示在光镜或电镜下观察目的mRNA或DNA的存在与定位。做核酸杂交时,首先要进行预杂交,即用非特异的核酸溶液封闭膜上的非特异性结合位点。RNA杂交缓冲液(无甲酰胺)主要由PIPES、0.1mmol/L EDTA、去离子甲酰胺以及盐离子组成,多用于DNA-RNA或RNA-RNA的杂交。