产品中心
技术交流
扫描二维码
雏田生物：深挖 EAE 小鼠模型，开启自身免疫疾病研究新航道
EAE，全称实验性自身免疫性脑脊髓炎（Experimental Autoimmune Encephalomyelitis） ，是一种在科研领域广泛研究的自身免疫性疾病模型。从发病机制来看，它主要是由于机体的免疫系统出现异常，错误地将中枢神经系统中的髓鞘当成外来的有害物质进行攻击。EAE 与人类的多发性硬化症（MS）有着极为紧密的关联。
由于多发性硬化症的发病机制复杂，且人体研究存在诸多限制，EAE 小鼠模型就成为了研究多发性硬化症发病机制、探索治疗方法的重要工具。通过对 EAE 小鼠模型的研究，科研人员能够深入了解免疫系统如何攻击中枢神经系统，以及疾病发展过程中的各种变化，为开发治疗多发性硬化症的药物和疗法提供关键的理论依据和实验支持。
造模小鼠选择
在构建 EAE 小鼠模型时，实验动物的选择十分关键。雏田生物选用的是 C57BL/6 小鼠，这种小鼠品系背景清晰，对 EAE 具有较高的易感性，能够稳定地模拟出 EAE 的发病过程和症状，为研究提供可靠的实验基础。选择 8 - 10 周龄的小鼠，是因为这个年龄段的小鼠身体发育成熟，免疫系统也较为稳定，能够更好地对实验处理产生反应，保证实验结果的一致性和可靠性。而雄性小鼠在实验中表现出相对稳定的生理状态和免疫反应，减少了因性别差异带来的实验误差。
EAE小鼠造模流程
1. 试剂配制：这是造模的基础环节，每一种试剂的配制都需严格
按照标准进行。
1)PertussisToxin(PTX):50ug PTX+0.5ml ddH2O制备成100ng/ul, 保存于4℃，临用前以无菌PBS稀释成1ng/ul，现用现配。
2)CompleteFreund'sAdjuvant(CFA):100mgM.tuberculosis 加入20ml IFA中，制备成5mg/ml, 保存于4℃，临用前充分震荡混匀。
3)Myelinoligodendrocyteglycoproteinpeptide(MOG)：10mg MOG35-55 加入4ml 无菌PBS中制备成2.5mg/ml,保存于-20冰箱，一般现用现配。
2. 乳化：这是整个造模过程中的关键步骤，乳化效果的好坏直接关系到模型的成功与否。具体操作是用 20ml 注射器接三通，按 1:1 体积比将 2.5mg/ml 的 MOG 逐滴滴加到 CFA 中，然后使用 IKAT10 basic ULTRA-TURRAX 进行充分乳化。
3.PTX注射：先将 100ng/ul 的 PTx 以无菌 PBS 稀释成 1ng/ul，然后进行尾静脉注射，每只注射 100ul 。
4. 小鼠麻醉：为了确保注射操作的顺利进行，避免小鼠挣扎造成伤害和实验误差，需要对小鼠进行麻醉。每只小鼠腹腔注射 180 - 200ul 0.8% 戊巴比妥钠溶液，注射时要注意剂量准确，速度适中，密切观察小鼠的反应，待小鼠进入麻醉状态后再进行后续操作。
5.MOG注射：皮下注射MOG:CFA乳化剂，大腿根部皮下，每侧100ul。
6.48小时后，再次尾静脉注射PTX,同步骤3。
评估与判断：如何确定模型是否成功
在完成 EAE 小鼠模型造模后，需要通过科学的方法来评估模型是否成功。临床评分是一种常用的评估方式，通过观察小鼠的行为和症状表现，对其发病程度进行量化评分 。比如 Kono’s 5分法评分标准，具体如下：
· 0 分：小鼠无任何症状，活动自如，与正常小鼠无异，这表明小鼠未发病，模型诱导不成功 ；
· 1 分：小鼠尾巴无力，正常情况下小鼠尾巴能够灵活摆动，而此时尾巴无法正常抬起或摆动，表现出软弱无力的状态 。
· 2 分：小鼠出现一侧后肢无力或部分瘫痪，行走时该侧后肢会出现拖地、无法正常支撑身体等情况，导致步态异常 。
· 3 分：小鼠双侧后肢瘫痪，无法站立和行走，只能依靠前肢拖动身体前行，后肢完全失去运动能力 。
· 4 分：小鼠双侧后瘫痪，且前肢无力或部分瘫痪，此时小鼠基本失去自主活动能力，身体伏地，仅能进行微弱的移动 。
· 5 分：小鼠死亡，标志着疾病发展到了最严重的阶段 。
·
除了临床评分，还可以通过组织学评估，如对小鼠中枢神经系统进行 HE 染色，观察炎症细胞浸润、脱髓鞘等病理变化；利用分子生物学技术检测相关细胞因子的表达水平，从分子层面了解免疫反应情况 。这些综合评估方法能够准确判断 EAE 小鼠模型是否成功构建，为后续的研究提供可靠的实验基础 。
雏田生物：您 EAE小鼠模型造模的最佳伙伴
在 EAE 小鼠模型造模领域，雏田生物凭借其多方面的显著优势，成为科研人员值得信赖的合作伙伴 。
雏田生物深知不同科研项目对 EAE 小鼠模型的需求各异，因此提供高度定制化的服务。无论是针对小分子药物、XDC（偶联药物）、细胞治疗领域的研究，还是从靶点验证到药效评估的各个环节，都能精准匹配创新药企的需求。比如，在一些研究中，需要特定基因修饰的 EAE 小鼠模型，雏田生物的专业团队能够利用先进的基因编辑技术，为客户量身打造符合要求的模型，助力 “First - in - Class” 药物的开发 。
展望未来：EAE研究的新征程
展望未来，EAE 疾病的研究有望在多个方向取得进一步突破 。在发病机制研究方面，随着单细胞测序、基因编辑等技术的不断发展，我们将能够更深入地探究疾病发生发展过程中细胞和分子层面的变化 。
而雏田生物也将继续在 EAE 小鼠模型造模领域深耕，不断优化服务，提升技术水平，为科研人员提供更优质的 EAE 小鼠模型和专业的技术支持 。相信在科研人员的共同努力下，我们对 EAE 疾病的认识将不断深入，最终找到治愈多发性硬化症等相关疾病的方法，为患者带来福音 。更多雏田生物相关介绍和活动，请查看往期文章分享：雏田生物(HinataBio)|以“模型无界”+“全链智控”，赋能创新药临床转化！(文末有惊喜)
深度咨询
让雏田成为您的“模型智囊团”
1v1沟通，定制您的“研发加速地图”！
粤公网安备 44010602000473号
粤ICP备09063491号
营业执照
