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脑原位肿瘤模型构建全攻略从流程到实操

2026-07-07




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ONE

脑原位肿瘤模型构建



1.明确研究目标

确定研究的具体方向,如脑胶质瘤、脑转移瘤或特定基因突变的肿瘤。

选择适合的动物模型(如小鼠、大鼠等),考虑其免疫背景和肿瘤生长特性。


2.实验设计

确定模型构建方法,如细胞移植、基因编辑或化学诱导。

设计对照组和实验组,确保实验的科学性和可重复性。




3.模型构建方法

细胞移植模型

基因编辑模型

化学诱导模型


4.模型验证

通过影像学检查(如IVIS Lumina LT)监测肿瘤生长情况。

进行组织病理学分析,验证肿瘤的组织学特征和标志物表达。




5.数据分析

收集肿瘤体积、动物生存期、分子标志物等数据,进行统计分析。

结合文献对比,验证实验结果的意义。




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TWO
模型构建操作
PART.01
实验准备

材料与设备

小鼠(如C57BL/6或裸鼠,根据实验需求选择免疫背景)。

肿瘤细胞系(如GL261、U87)或患者来源的肿瘤细胞(PDX模型)。

立体定位仪、微量注射器、手术器械。

麻醉剂(如异氟烷)、消毒用品、无菌操作台。

细胞准备

培养肿瘤细胞至对数生长期,确保细胞活力。

用PBS洗涤细胞,调整细胞浓度(通常为1×10^5至1×10^6个细胞/µL)。


PART.02

操作步骤

麻醉小鼠

使用异氟烷或其他麻醉剂麻醉小鼠,确保小鼠处于深度麻醉状态。

固定小鼠

将小鼠头部固定在立体定位仪上,调整头部位置使其水平。

开颅手术

用碘伏消毒小鼠头部皮肤,沿中线切开皮肤,暴露颅骨。

使用牙科钻在目标区域(如前额叶或基底节)钻孔,注意避免损伤脑组织。

细胞注射

用微量注射器吸取肿瘤细胞悬液。

将针头缓慢插入目标脑区(深度根据实验需求调整,通常为2-3 mm)。

缓慢注入细胞悬液(体积通常为2-5 µL),注射完成后保持针头在原位1-2分钟,防止细胞回流。

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缝合与恢复

取出针头,用无菌生理盐水冲洗手术区域。

缝合皮肤切口,涂抹抗生素软膏。

将小鼠置于温暖环境中恢复,直至完全苏醒。



PART.03

术后管理与模型验证

术后护理

观察小鼠行为状态,确保无感染或其他并发症。

提供充足的食物和水,必要时给予镇痛药物。

肿瘤生长监测

使用活体成像(如荧光或生物发光成像IVIS Lumina LT系统)定期监测肿瘤生长。

记录肿瘤体积和动物生存期。

组织病理学分析

在实验终点处死小鼠,取脑组织进行固定和切片。

通过HE染色或免疫组化分析肿瘤的组织学特征和标志物表达。



脑原位肿瘤模型构建是研究脑肿瘤的重要工具,但其成功与否取决于实验设计的科学性、操作的规范性以及数据分析的严谨性。在构建过程中,需综合考虑研究目标、模型选择、伦理规范等因素,以确保研究结果的可靠性和应用价值。



联系热线:15021163010 

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