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新品推送 | ER/BRD4 RIPTAC三元复合物检测试剂
内分泌耐药持续制约乳腺癌新药开发，RIPTAC作为区别于PROTAC的诱导接近技术，为ER阳性耐药乳腺癌开辟全新研发路径。但如何高效评价RIPTAC分子桥接蛋白的真实能力呢？我们全新推出ER/BRD4 RIPTAC Binding Assay Kit（货号RVMTO051），依托HTRF均相荧光技术，检测ER‑RIPTAC‑BRD4三元复合物形成水平，把分子的桥接活性转化为可量化、可高通量的实验数据.
单靶点活性≠有效的三元桥接活性
在ER阳性乳腺癌研发赛道，SERD、ER‑PROTAC已经取得诸多进展，但ESR1突变（Y537S、D538G）介导的内分泌耐药，依旧是临床未被满足的巨大缺口。传统策略大多聚焦于抑制或者降解ER蛋白本身，而ER‑BRD4 RIPTAC是不一样的思路：不追求降解ER，而是借助小分子把ER和BRD4拉到一起，破坏BRD4对ER下游癌基因的转录共激活，直接掐断肿瘤细胞的增殖信号。
这带来了研发逻辑上的关键转变
评价RIPTAC候选分子，不能只看小分子对ER的结合IC₅₀，也不能只看对BRD4的抑制活性。一个分子对两个靶点亲和力再好，如果无法稳定组装ER‑RIPTAC‑BRD4三元复合物，就无法发挥RIPTAC特有的药理效应。
在实际药物筛选中，研究者常遇到这些难题
化合物数量大，需要高通量体系，传统Co‑IP无法支撑大规模初筛。
细胞水平表型实验干扰因素多，很难区分药效来自“三元桥接”还是单靶点
实验室自建FRET体系，蛋白标记、抗体条件优化耗时长，批间重复性差，不利于SAR构效关系迭代。一套经过完整预优化、即用型的三元复合物检测试剂盒，正是解决上述痛点的关键。我们的新品试剂盒，专门针对ER‑BRD4 RIPTAC场景开发，把三元复合物检测标准化，助力从海量化合物中快速筛选真正具备桥接能力的RIPTAC分子。
试剂盒工作原理
试剂盒采用成熟的HTRF®均相时间分辨荧光平台，体系包含带不同标签的Tag1‑ER蛋白、Tag2‑BRD4蛋白，搭配Anti‑Tag1‑Tb供体抗体、Anti‑Tag2‑d2受体抗体。
当体系中存在活性RIPTAC分子时，小分子充当“分子桥梁”，介导ER与BRD4发生蛋白‑蛋白靠近，同时供体与受体荧光基团距离缩短至10 nm以内，可触发FRET能量转移，产生665 nm特征荧光。信号强弱与体系内ER‑RIPTAC‑BRD4三元复合物的形成量呈正相关。
极简均相操作流程
整体反应体积20 μL，全程无洗涤步骤，大幅减少操作误差，适配白色384孔板、96孔低体积HTRF专用板，兼容自动化工作站，适配高通量筛选。
核心性能亮点
采用全长ER蛋白构建检测模型，而非截断蛋白
截断蛋白结构单一、缺失完整蛋白天然构象，无法真实模拟肿瘤细胞内全长ER蛋白与BRD4、RIPTAC小分子的结合模式，易出现体外筛选假阳性、细胞体内药效脱节的问题。
高特异性与优异信号窗口
参考阳性RIPTAC分子验证S/B可达28.5，表观EC₅₀低至3.35 nM；JQ‑1等对照分子维持基线信号；可清晰区分活性分子与无活性分子，高浓度下可见双功能分子典型钩效应。
数据稳定可复用
严格管控冻融次数前提下，复孔CV＜8%，批内、批间重复性优异，不同批次实验数据具备可比性。
化合物溶剂友好
DMSO耐受上限1%，匹配绝大多数小分子化合物库的给药条件。
开盒即用，降低方法学门槛
缓冲液预配制，ER、BRD4蛋白为100×浓缩液，检测抗体为100×浓缩液，省去蛋白表达纯化、标记、抗体条件摸索的大量工作。
Note：试剂盒输出为表观EC₅₀，数值会随ER、BRD4蛋白工作浓度、读板设备改变；同一套实验条件下，可以横向对比不同候选分子的相对桥接活性。
验证数据
以参考ER‑BRD4 RIPTAC分子作为阳性，JQ‑1作为阴性对照完成试剂盒验证：
哪些研发场景可以使用？
创新药研发企业
ER‑BRD4 RIPTAC高通量初筛、SAR构效关系研究、先导化合物迭代优化。区分分子真实RIPTAC桥接效应与单靶点抑制带来的假阳性结果。
CRO/CDMO服务平台
标准化体外三元复合物检测方案，输出稳定、可复现的筛选数据，支撑客户RIPTAC管线项目推进。
高校、科研院所与转化医学中心
ER‑BRD4诱导接近机制研究；探究RIPTAC分子如何调控ER转录通路；开展蛋白互作相关基础科研。
产品货号&规格
瑞孚迪MTO检测试剂盒矩阵
除本次上新ER/BRD4 RIPTAC三元复合物检测试剂盒，我们拥有完整的PROTAC/RIPTAC体外检测产品，覆盖AR、KRAS、BRD4、BTK、BCL‑XL、GSPT1、STAT6等热门靶点，同时提供BRD4溴结构域单靶点结合检测试剂盒。
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